Количественный phosphoproteomic анализ был выполнен, используя SILAC (Стабильная Маркировка Изотопа Аминокислотами в Клеточной культуре), объединен с сильной разбивкой обмена катиона и phosphopeptide обогащением остановленной металлической хроматографией близости (IMAC), сопровождаемой мультиплексной количественной масс-спектрометрией.Исследование показало изменения в фосфорилировании 94 белков спустя только 25 минут после воздействия Shh. Анализ мотива показал роман и решающую роль для киназы, CK2, на посреднических 45 процентах всех ранних событий фосфорилирования. Значительно, CK2 затрагивает предельное Гд сигнальные компоненты, обходя проблемы появления сопротивления и априорного сопротивления, с которым обычно сталкиваются с существующими маленькими ингибиторами молекулы, развитыми для medulloblastoma.
Ингибиторы CK2 продемонстрировали рано и выдержали запрещение Гд, сигнализирующего через несколько типов клетки млекопитающих, включая клетки MB. В естественных условиях мыши, питающие фланг аллотрансплантаты MB, произошли из Ptch +/−; Tpr53−/− опухоль, питающая точечную мутацию в Smo, который отдает им стойкий к другим ингибиторам пути Гд, показала почти полное прекращение роста опухоли в ответ на TBB, очень мощный и отборный ингибитор CK2.
Этот количественный подход phosphoproteomic к передаче сигналов Гд обеспечил перспективу, которая была недосягаема с предыдущей транскрипцией и основанными на геноме усилиями. Этот успех, используя один путь заложит основу других, чтобы применить аналогичный подход в различных путях инициирования опухоли.